Analyysiolosuhteiden siirto eri nestekromatografiamuotojen välillä

HELSINGIN YLIOPISTO _ HELSINGFORS UNIVERSITET

ee

ok-

pro

gradu

Mat.

-l

uonnontieteel I inen

T¡od€kunl¡/Olrlto - ^Frkult€t So¡tid

1990-91 kevät

sv

I

^sv

uppgrlt€r

Liitteet

^I-X

Farmasian

laitos,

farmakognosian osasto

TLC, 0PLC, HPLC, "PRISMA"

malli,

^kumari

init,

^o

Av0n3€nal - ^Nyctelord

timointi

OÞprarne - Laroamno

Farmakognos i ^a

s i i

rto eri

nestekromatograf i a-

muotojen

välillä.

trtâl

iolosuhteiden

n

ntml

a v v^S

Eeva-Liisa

^Rahko

Farmasian

laitos

- lnatilution

Analyysiolosuhteiden

si

irrol la tarkoitetaan sitä, että

tietyl lä

kromatografiamenetelmäl

lä optimoidut analyysi- olosuhteet

si

irretään toiseen

kromatografiamenetelmään.

Nestekromatografisten menetelmien

alkuoptimoinnissa

^käy-

tetään usein

ohutkerroskromatografiaa ^(TLC)

tai

^korkea-

painenestekromatografiaa (HPLC). TLC:n etuna

on

sen yk-

sinkertaisuus,

nopeus

ja taloudellisuus.

^TLC:

llä

^pystytään

läpikäymään

suuret

määrät

erilaisia liuotinyhdistelmiä

parhaan

mahdollisen lÍikkuvan faasin löytämiseksi.

"PRISMA"

optimointisysteemi

koostuu kolmesta osasta.

Ensimmäinen osa

käsittää käytettävän

kromatografiamene- telmän

ja _kiinteän faasin valinnan. Lisäksi valitaan

yksittäiset liuottimet, joista

muodostetaan varsinainen

"PRISMA"

optimointisysteemin toisessa osassa.

"PRISMA"

mal I

in

avul

la

voidaan käydä

systemaattisesti läpi eri

I

iuotinyhdistelmät

^val

ituista

^I

iuottimista optimiajo-

I iuoksen

löytämiseksi.

^Kun

analyysiolosuhteet

on

opti- moitu,

si

irrytään

"PRISMA" systeemin kolmanteen ^osaan,

joka käsittää ajotavan valinnan,

optimoidun

liikkuvan faasin

si

irron muihin

kromatografiamenetelmi

in

sekä

käyttöparametrien

val innan näi I

le

uusi I

le

^{menetelmi I}

^le.

Analyysiolosuhteita siirrettäessä

on huomioitava useita

eri parametreja, kuten kiinteän ja _liikkuvan faasin

omi-

naisuudet, näyte ja

_sen

appiisointitapa, häiritsevän

vyöhykkeen muodostumunen sekä

liuotinrintamien

^muodostu-

minen. Eri

menetelmiä

analyysiolosuhteiden siirtoon

ovat

ajoliuoksen

ajonopeuden

ja

liuosvoimakkuuden

säätö

sopi-

vaksi

sekä

esiajo sopivalla liuottimella.

Työn

tarkoituksena

ol

i tutkia analyysiolosuhteiden

si

irtoa

normaal

ifaasi

^(NP)-TLC:

ltä

^{NP-0PLC: I}

le

^(pääl

iepaineistetta- va tasokromatografia) ja

NP:HPLC:lle sekä

seurata

^16-18

kumari

inin kromatografista käyttäytymistä

näi I 1ä menetei-

millä.

Kaikki kumariinit käyttäytyivät ^hyvin

^samalla

tavalia

sekä

prisman horisontaal

i- että vertikaal

isuunnassa

analyysi- olosuhteiden

^pysyessä samanlaisina. ^NP-TLC

sopii

^hyvin

analyysiolosuhteiden optimointiin ja

nämä

TLC:llä

optimoi-

dut olosuhteet

voidaan

siirtää

NP-0PLC:1le

ia

NP-HPLC.:lie.