• Ei tuloksia

7.1. Materiaalit

Piperasilliini-tatsobaktaamivalmisteet Stragen® (ST), Reig-Jofre® (RJ) ja Fresenius Kabi® (FK).

Aqua Sterilisata Braun®, i.v, infuusioneste, liuos, 1000 ml (steriili vesi).

Natriumkloridi B. Braun® 9 mg/ml, i.v, Infuusioneste, liuos, 1000 ml (NaCl).

7.2. Differentiaalinen pyyhkäisykalorimetria (DSC)

Piperasilliini-tatsobaktaamivalmisteista ST, RJ, ja FK valmistettiin kolme rinnakkaisnäytettä, jotka analysoitiin differentiaalisella pyyhkäisykalorimetrilla (DSC) (Mettler Toledo, DSC1 Star system, Sveitsi). Valmisteita käänneltiin injektiopullossa ennen näytteenottoa. Näytteet analysoitiin kahdella eri DSC -ajo-ohjelmalla (Taulukko 2).

Taulukko 2. Tutkimuksessa käytetyt DSC -ajo-ohjelmat.

Ajo-ohjelma 1 Ajo-ohjelma 2

Lämpötila T (°C) Aika t (min) Lämpötila T (°C) Aika t (min)

25 1 25 1

25–200 10 C/min 100 20

-30 20

200 10 C/min

7.3. Partikkelikokoanalyysi

ST, RJ ja FK valmisteiden partikkelikoko laskettiin mikroskoopilla (Nikon eclipse LV100, Japani) ja NIS-Elements AR 3,0 ohjelmalla noin tuhannelle partikkelille. Valmisteita käänneltiin injektiopullossa ennen näytteenottoa. Kustakin valmisteesta analysoitiin yksi näyte (>1000 partikkelia).

32 7.4. Mikroskoopilla lämmitys

ST, RJ ja FK valmisteita lämmitettiin mikroskooppiin asetetulla lämpöpöydällä (Linkam, Englanti) yli 200 °C lämpötilaan ja tarkasteltiin niiden käyttäytymistä visuaalisesti kuvantaen Linksys 32 ja NIS-Elements AR 3,0 -ohjelmilla. Kustakin valmisteesta tutkittiin yksi näyte.

7.5. Valmisteiden käyttökuntoon saattaminen automaation avulla

Tutkittiin ST, RJ ja FK valmisteiden käyttökuntoon saattamista NewIconin IV ICON Twins robotilla NewIconin testipenkissä Kuopiossa. Tutkimuksessa käytetyt piperasilliini-tatsobaktaamivalmisteiden määrät on esitetty taulukossa 3. Robotti käsitteli kerrallaan yhden rivin (4 injektiopulloa), joihin ohjelma lisäsi nesteen neulalla (Baxter Twofer 16G Short with Huber Point, REF 16004) yksitellen ennen sekoitusta. Ohjelman lopuksi robotti palautti injektiopullot paletille.

Robotti kalibroitiin ennen ohjelman ajamista punnitsemalla tyhjät injektiopullot vaa’alla ennen nesteen lisäystä ja nesteen lisäyksen jälkeen (Vetek PS 1000.R2, Radwak, Puola). Vaaka taarattiin 20 g, 100 g ja 200 g punnuksilla ennen käyttöä. Tutkittavat injektiopullot punnittiin ennen ja jälkeen nesteen lisäyksen. Kuiva-aineen liukenemista injektiopulloissa seurattiin tietyillä ajanhetkillä ja 30 minuutin jälkeen injektiopullot siirrettiin jääkaappiin. Jääkaapin lämpötila varmennettiin Fluke 52 Thermometer (Washington, Yhdysvallat) lämpömittarilla, että se pysyi 6–7 C lämpötilassa.

Taulukko 3. Tutkimuksessa käytetyt piperasilliini-tatsobaktaamivalmistemäärät (n).

Valmiste n

Stragen 128

Reig Jofre 69

Fresenius Kabi 19

Yhteensä 216

NewIconin IV ICON Twins robotissa injektiopullot ovat paletilla riveissä ja yhdellä rivillä on neljä injektiopulloa, jotka robotti ottaa kerralla käsittelyyn. Yhdellä paletilla on kuusi riviä ja yhteensä 24 injektiopulloa. Rivissä injektiopullot ovat ”etu-”, ”etu2-”, ”taka2-” ja ”taka” -positioissa, joista viimeisimpään robotti lisää ensin nesteen, jolloin takapositiossa oleva injektiopullo seisoo nesteen kanssa hieman pidempään kuin muut injektiopullot ennen sekoitusta. Yhdelle robotille mahtuu kerrallaan kaksi palettia ja robotissa on kaksi robottipäätä, jolloin samanaikaisesti voidaan ajaa neljä palettia (n=96), kun käytetään molempia robotteja. Tutkimuksessa tehtiin ajoja yksittäisillä

33 injektiopulloilla tai useammilla rinnakkaisilla näytteillä (n=2,3,4,24). Kustannussyistä tutkimusta pyrittiin tekemään pienellä määrällä näytteitä.

Tavoitteena piperasilliini-tatsobaktaamin käyttökuntoon saattamiselle oli, että lääkejauhe liukenisi mahdollisimman nopeasti ja mahdollisimman lyhyellä sekoitusajalla. Käytännön tavoitteeksi otettiin 30 sekunnin sekoitukset, jonka jälkeen jauheen tulisi liueta alle kolmessa tunnissa. Tutkimusta tehtiin sekä 20 ml steriilillä vedellä että 50 ml fysiologisella suolaliuoksella. Pääasiassa keskityttiin 50 ml fysiologisen suolaliuoksen lisäykseen, jolloin lääkevalmisteen voisi mahdollisesti annostella potilaalle infuusiona suoraan injektiopullosta, mikä vähentäisi muita työvaiheita.

7.5.1. 20 ml steriilin veden lisäys

Tutkittiin ST, RJ ja FK valmisteiden käyttökuntoon saattamista eri sekoitusohjelmilla, kun valmisteisiin lisättiin 20 ml steriiliä vettä. Tutkimuksessa käytettiin robotilla valmiiksi olevia sekoitusohjelmia: nopeaa sekoitusta (horisontaalista ja vertikaalista sekoitusta) ja hidasta sekoitusta (kääntely) (Taulukko 4). Sekoitusohjelmat on tässä työssä esitetty pelkistetyssä muodossa.

Sekoitukset tehtiin nesteen lisäyksen jälkeen. Kaksi rinnakkaista injektiopulloa jokaisesta valmisteesta ajettiin kerrallaan molemmilla sekoitusohjelmilla robotin rivin etu- ja takapositioissa.

Valmisteista tutkittiin yhteensä neljä injektiopulloa. Injektiopullot punnittiin ennen ja jälkeen nesteen lisäyksen. Kuiva-aineen liukenemista nesteeseen havainnoitiin silmämääräisesti ajanhetkillä 1 min, 5 min, 10 min, 20 min, 30 min, 1 h, 2 h, 4 h ja 24 h. Injektiopullot siirrettiin jääkaappiin 30 minuutin aikapisteen kohdalla, jotta pystyttäisiin paremmin simuloimaan sairaala-apteekin valmistusolosuhteita.

Taulukko 4. Tutkimuksessa käytetyt sekoitusohjelmat ja sekoitusajat t (s).

Sekoitus Aika t (s) Nopea kombo 30 + 30

Hidas 30

34 7.5.2. 50 ml fysiologisen suolaliuoksen lisäys

Tutkittiin ST, RJ ja FK valmisteiden käyttökuntoon saattamista eri sekoitusohjelmilla ja sekoitusajoilla, kun valmisteisiin lisättiin 50 ml fysiologista suolaliuosta (NaCl). Tutkimuksessa keskityttiin pääasiassa ST ja RJ valmisteisiin ja lopuksi optimoitua menetelmää testattiin myös FK- valmisteella. NaCl-liuos lisättiin joko kerralla tai kahdessa eri erässä (20+30 ml, 30+20 ml, 40+10 ml tai 25+25 ml). Tutkimuksessa käytettiin edellä mainittuja (Taulukko 4) sekoitusohjelmia eri kestoilla ja eri nopeuksilla. Myös seisotuksen vaikutusta liukenemisaikaan nesteen lisäysten välissä tutkittiin.

Tutkimusta tehtiin yksittäisillä, kahdella tai kolmella rinnakkaisella näytteellä ja täydellä rivillä, jossa oli neljä rinnakkaista injektiopulloa. Kustannussyistä näytteiden määrä pyrittiin pitämään alhaisena.

Injektiopullot punnittiin ennen ja jälkeen nesteen lisäyksen. Liukenemista havainnoitiin silmämääräisesti ajanhetkillä 5 min, 10 min, 30 min, 1 h, 2 h, 3 h, 4 h ja 24 h. Injektiopullot siirrettiin jääkaappiin 30 minuutin aikapisteen kohdalla, jotta pystyttäisiin paremmin simuloimaan sairaala-apteekin valmistusolosuhteita.

Alustavissa tutkimuksissa 50 ml NaCl lisättiin kerralla ja sekoitusohjelmina käytettiin hidasta (30s) ja nopeaa (30s + 30s) ravistelua. Alustavat tutkimukset tehtiin kahtena rinnakkaisena kokeena siten, että rinnakkaiset näytteet olivat robotin rivin eri päissä (etu- ja takapositioissa).

Jatkotutkimuksissa tutkittiin ST ja RJ valmisteilla 50 ml NaCl lisäystä kahdessa eri erässä, jotta jauhe saataisiin paremmin nousemaan pinnalle, painetta saataisiin tasattua, ja jauheen liukenemisnopeutta saataisiin parannettua. Aluksi tutkittiin 20 ml + 30 ml NaCl lisäystä ja sekoituksia molempien nesteen lisäysten jälkeen. Tutkimukset tehtiin kolmella rinnakkaisella näytteellä robotin eri kohdissa kolmella eri sekoitusohjelmalla. Lisäksi tutkittiin 30 ml + 20 ml NaCl lisäyksiä ja sekoitusta vain ensimmäisen nesteen lisäyksen jälkeen. Tutkimusta tehtiin kaikilla kolmella valmisteella sekä yksittäisillä että koko rivin ajoilla.

7.5.3. 48 ml fysiologisen suolaliuoksen lisäys

Tutkittiin alustavasti seitsemällä ST valmisteella pienemmän nestemäärän lisäystä injektiopulloon, jotta voitaisiin välttää nesteen kuohumista ulos injektiopullosta puhdastiloissa. ST valmiste poikkesi muista valmisteista pienemmän injektiopullon osalta. 4,5 g piperasilliini -tatsobaktaamia syrjäyttää 3,15 ml nestettä, joten myös 48 ml lisäysmäärällä päästäisiin yli 50 ml kokonaistilavuuteen, joka voitaisiin annostella potilaalle. Sekoitusohjelmana käytettiin optimoitua menetelmää (30s hidas

35 kääntely) ja 20 minuutin seisotusaikaa sekä kääntelyllä ennen nesteen lisäystä (5s nopea ravistelu) että ilman kääntelyä.

7.5.4. Menetelmän optimointi - muut tutkimukset

Liukenemisajan optimoimiseksi robotille ohjelmoitiin kaksi uutta sekoitusohjelmaa: ”korkki alaspäin ravistelu” ja ”pyörivä liike”. Uusia sekoitusohjelmia kokeiltiin alustavasti yksittäisillä injektiopulloilla, ”korkki alaspäin ravistelua” kolmella ja ”pyörivää liikettä” kahdella ST valmisteella, kun niihin lisättiin 20 ml vettä. Uusien ohjelmien tavoitteena oli irrottaa jauhetta enemmän injektiopullon pohjasta ja siten nopeuttaa liukenemisaikaa.

Nestesuihkun optimoimiseksi robotilla kokeiltiin myös toista neulaa (B. Braun Vented Needle, lateral flow, REF 415072, Product Code VN1000L, materiaali muovi), joka suihkuttaa nesteen molemmilta puolilta neulaa injektiopullon vastakkaisille sivuille. Uutta neulaa kokeiltiin ST ja RJ valmisteilla, kun niihin lisättiin 20 ml vettä tai 50 ml NaCl eri sekoitusohjelmilla. ST valmisteella tutkittiin yhteensä 21 ja RJ valmisteella 14 injektiopulloa. Tutkimuksen tavoitteena oli irrottaa jauhetta injektiopullon pohjasta nesteen lisäysvaiheessa tai vähentää sen kakkuuntumista injektiopullon pohjalle.

Jauheen irrotusta pohjasta ennen nesteen lisäystä tutkittiin käsin kääntelemällä ja lisäksi robotille ohjelmoitiin 5 sekunnin mittainen nopea ravistelu ennen nesteen lisäystä. Ohjelmaa muokattiin siten, että injektiopullo pysähtyisi niin, että jauhe jäisi mahdollisimman pitkälle injektiopullon pohjalle eikä pullon korkkiin tai kaulaan nesteenlisäysvaiheessa. Tutkimusta tehtiin ST, RJ ja FK valmisteilla.

7.5.5. Menetelmän testaus Stragen -valmisteella

Menetelmän toimivuuden varmistamiseksi ajettiin täysi paletillinen (n=24) ST valmistetta optimoidulla ajo-ohjelmalla: 5 s nopea ravistus jauheen irrottamiseksi pohjasta ennen nesteen lisäystä, 30 ml NaCl lisäys, jonka jälkeen 30 s hidas kääntely, 20 minuutin seisotus, ja lopuksi 20 ml NaCl lisäys. Liukenemista havainnoitiin silmämääräisesti aikapisteissä 5 min, 10 min, 30 min, 1 h, 2 h, 3 h, 4 h, 5 h ja 24h. 30 minuutin jälkeen näytteet siirrettiin jääkaappiin.

36 7.5.6. Nesteen lisäystarkkuus

Tutkittavat injektiopullot punnittiin ennen ja jälkeen nesteen lisäyksen vaa’alla (Vetek PS 1000.R2, Radwak, Puola) ja nestelisäysten määrille (ml) laskettiin keskiarvot ja keskihajonnat. Vaaka kalibroitiin ennen käyttöä. Tuloksiin ei sisällytetty paineen johdosta ylikuohuneita näytteitä.

7.5.7. Käyttökuntoon saattamisprosessin kesto

Tehtiin laskelmia piperasilliini-tatsobaktaamin käyttökuntoon saattamisen kokonaiskestolle IV ICON Twins robotilla, kun saatetaan käyttökuntoon esimerkiksi 100 injektiopulloa eri sekoitusohjelmilla.

RJ valmiste ajettiin täydellä paletilla, jossa yksi rivi oli lääkeainetta ja loput tyhjiä injektiopulloja, ja aikaa mitattiin kokonaisprosessin kestolle. Sekoitusohjelmana käytettiin 30s hidasta kääntelyä 20 min seisotusajalla (30 + 20ml NaCl lisäykset). 20 minuutin seisotusaika sisältyi prosessiin, kun injektiopullot odottivat paletilla seuraavaa nesteenlisäyskierrosta.